Práctica 52: Prueba cruzada mayor. (PLXIV)(B4)
Fecha: 22-5-15
Prueba cruzada mayor.
Introducción:
-El objetivo de las pruebas pre-transfusionales es detectar las posibles reacciones antígeno-anticuerpo entre la sangre del donante y el receptor, antes de la transfusión. Para ello se realiza:
-Tipaje correcto de AB0 y Rh del donante y receptor.
-Escrutinio de los anticuerpos irregulares en el receptor.
-Prueba cruzada mayor.
Material:
-Tubos de hemólisis.
-Centrífuga.
-Pipetas pasteur.
-Gradilla.
-Reloj.
Reactivos:
-Suero salino al 0,9%.
-Albúmina bovina al 30%.
-Suero de Coombs.
Muestras:
-Suero del receptor.
-Hematíes lavados en suspensión de entre 2 y 5% del donante.
Fundamento:
-La práctica consiste ne enfrentar el suero del receptor con los hematíes del donante, primero en medio salino, posteriormente en medio albuminoso, y por último frente al suero de Coombs. Con este último paso detectaremos los anticuerpos que se hayan quedado fijados a la membrana eritrocitaria.
Procedimiento:
1. En un tubo de hemólisis depositamos 1 gota de suspensión del donante + 2 gotas de suero del receptor.
2. Mezclamos suavemente y dejamos reposar 2-3 minutos.
3. Centrifugamos a 2500rpm durante 1 minuto (3500rpm-30 segundos).
4. Leer los resultados, si aglutina, paramos, no son compatibles, si no aglutina, seguimos.
5. Añadimos 3 gotas de Albúmina bovina al 30% y mezclamos.
6. Incubamos a 37ºC durante 30 minutos.
7. Centrifugamos a 2500rpm durante 1 minuto(3500rpm-30 segundos).
8. Leer los resultados, si aglutina, paramos, no son compatibles, si no aglutina, seguimos.
9. Lavamos los hematíes x3 veces y retirar bien el sobrenadante.
10. Añadimos 1 gota de suero de Coombs y mezclamos.
11. Centrifugamos a 1000rpm durante 2 minutos.
12. Leer los resultados en el visualizador luminoso.
Lectura de los resultados:
- La ausencia de aglutinación en todos los pasos indica que el donante y el receptor son compatibles y por tanto, la transfusión es posible.
-Si aglutina en cualquier paso, son incompatibles.
Práctica 51: Determinación rápida de hemoglobina.(PLIV)(B2)
Fecha: 21-5-15
Determinación rápida de hemoglobina.
Introducción:
-Para determinar la concentración de hemoglobina justo antes de una donanción, es necesario un método rápido aun que no sea muy preciso.
-Esta determinación se basa en el hecho de que a sangre con una [Hb] superior a la permitida, para efectuar la donación, tiene una densidad mayor a la de una solución de sulfato de cobre.
Material:
-Gasas y lancetas.
-Vaso de precipitado.
Reactivos:
-Solución de sulfato de cobre con densidad = 1,054g/cm3 en varones y 1,052g/cm3 en mujeres.
-Alcohol.
-Agua destilada.
Muestra:
-Sangre capilar.
Fundamento:
-Para varones, el sulfato de cobre debe tener la d=1,054g/cm3 por que la concentración de una gota de sangre sin anemia debe ser superior a 13g/dl.
-Para mujeres el sulfato de cobre debe tener la d=1,052g/cm3 por que la concentración de una gota de sangre sin anemia debe ser superior a 12g/dl.
Procedimiento:
1. Preparar la solución de sulfato de cobre con d=1,052g/dl:
-Disolver 17g de sulfato de cobre en 100,74ml de agua destilada.
-Mezcla 51ml de la solución anterior con 49ml de agua destilada.
2. Depositar una cantidad de esta solución en un vaso de precipitado de 50ml por jemplo.
3. Desinfectar la zona de punción y depositar una gota de sangre con impulso sobre la solución de sulfato de cobre.
4. Observar si la gota cae o sobrenada.
Lectura de los resultados:
-Si la gota cae es porque es más densa que el sulfato, por lo tanto tiene una concentración superior a la de una gota con anemia.
-Si sobrenada es presencia de anemia.
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